Atlas de histología vegetal y animal

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Técnicas histológicas. Protocolos.

COLORANTE

REACTIVO de SCHIFF

Es un reactivo muy utilizado en la tinción de PAS-hematoxilina. Es un compuesto preparado a partir de fucsina básica (clorohidrato de pararosanilina), ácido clorhídrico y metabisulfito sódico o potásico. Se utiliza tradicionalmente para detectar polisacáridos, más concretamente grupos aldehídos que se crean en sus moléculas durante el proceso de tinción (ver el protocolo de la tinción de PAS-Hematoxilina). Hay varias maneras de preparar el reactivo de Schiff según se describe en el libro de Martoja y Martoja. "Initiations aux techniques de l'hisotlogie animale". Pierson 1970 (Edición en español de 1970, Toray-Masson).

Procedimiento

Método de Coleman

Agua hirviendo ... 200 ml

Fucsina básica (clorhidrato de pararosanilina) ... 1 g
Dejar enfriar tras la disolución

Metabisulfito potásico ... 2 g

Ácido clorhídrico normal ... 10 ml
Al cabo de 24 h se añade:

Carbón activo ... 0.5 g

Agitar vigorosamente durante 1 min, dejar sedimentar y filtrar

Método de Lillie

Fucsina básica ... 1 g

Metabisulfito sódico ... 1.9 g

Áido clorhídrico ... 100 ml a 0.15 N
Dejar que la solución se decolore agitando de vez en cuando. Cuando haya una casi total decoloración (12 a 24 h) se continúa con la receta

Carbón activo ... 0.5 g

Agitar vigorosamente durante 1 min, dejar sedimentar y filtrar

Método de Graumann

Fucsina ácida ... 0.5 g

Metabisulfito potásico ... 0.5 g

Ácido clorhídrico ... 15 ml a 1 N

Agua destilada ... 85 ml
Mezclar las soluciones, dejar sedimentar durante 24 h. Cuando se alcance una decoloración casi total se sigue con la receta

Carbón activo ... 0.5 g

Agitar vigorosamente durante 1 min, dejar sedimentar y filtrar

Consejos

Independientemente del método de preparación del reactivo de Schiff, lasolución debe conservarse en la oscuridad en un frasco cerrado herméticamente. Es conveniente conservarlo en un frigorífico. Antes de cada uso comprobar que el reactivo desprende un olor sulfuroso. De lo contrario añadir 1 gota de ácido clorhídrico concentrado y unos decigramos de metabisulfito.

Productos

Fucsina básica

Metabisulficto sódico

Metabisulfito potásico

Ácido clorhídrico

Carbón activo

Agua destilada

Material

Probeta

Balanza

Agitador magnético / placa térmica

Vasos de precipitado

Botellas con cierre hermético

Papel de aluminio para mantenerlo en oscuridad

Nevera para su conservación

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Actualizado: 29-07-2019. 13:27