Atlas de histología vegetal y animal

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Técnicas histológicas. Protocolos.

TINCIÓN

AZUL de TOLUIDINA

Tejidos animales

La tinción con el azul de toluidina se puede usar para conseguir tinciones rápidas de tejidos animales. Es muy fácil de preparar y el tiempo de tinción es muy corto. Además, produce una reacción metacromática, es decir, es capaz de dar color diferente a diferentes estructuras. El color va desde verde brillante hasta púrpura, pasando por una gama de azules.

Procedimiento

Partimos de muestras que que han sido fijadas e incluidas en parafina. Estas muestras se han cortado en secciones de unas 8 µm y adheridas a portaobjetos recubiertos con gelatina.

1. 2x10 min en xileno para desparafinar

2. 2x10 min en etanol 100º

3. 10 min en etanol 96º

4. 10 min en etanol 80º

5. 10 min en etanol 50º

6. 5 min en H2O destilada

7. 30 s en azul de toluidina (C.I. 52040) 0.5 % en H2O destilada + 1 % de ácido acético glacial.

8. 10 s en etanol 96º con agitación

9. 2 x 10 s en etanol 100º con agitación

10. 2 min + 5 min en xileno

11. Montado con medio de montaje

Resultados

Núcleos: azules

Carbohidratos: azul o púrpura.

Citoplasma, ARN: azul o verde brillante.

Consejos

La intensidad de la tinción depende sobre todo de los tiempos de deshidratación, que han de ser muy rápidos y con agitación suave para acelerar el intercambio de líquidos en el tejido.

Se puede añadir un paso de molibdato amónico al 0.5 % en H2O destilada durante 5 min antes de los alcoholes de deshidratación. El molibdato hace que el colorante no se pierda con tant facilidad durante la deshidratación.

Productos

Xileno

Etanol de 50º, 70º, 80º, 90º, 96º y 100º

Azul de toluidina (C.I. 52040)

Ácido acético glacial

Molibdato amónico

H2O destilada

Medio de montaje

Material

Cubetas de tinción

Cesta para portas

Cubreobjetos

Azul de toluidina
Túbulo seminífero de un testículo de rata. Obsérvese cómo la cabeza de los espermatozoides tienen un color verde brillante en comparación con los núcleos de las espermátidas, los espermatocitos y espermatogonias.
Azul de toluidina
Imagen de un bazo.
Azul de toluidina
Detalle de la imagen de un bazo donde se puede apreciar la metacromasia, con células teñidas de púrpura y otras de azul.
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Actualizado: 29-07-2019. 13:27