Atlas de histología vegetal y animal

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Técnicas histológicas. Protocolos.

COLORANTE: AZUL de TOLUIDINA

El azul de toluidina (C.I. 52040) es un colorante catiónico que se puede usar en tinciones generales. Se ha empleado para teñir matrix extracelular, sobre todo en cartílago pues pone de manifiesto proteoglicanos y glicosomainoglicanos, también para estudiar osteoblastos, mastocitos, botones gustativos, cromosomas y otros. Presenta metacromasia. Esta metacromasia es útil en las tejidos vegetales puesto que distingue las paredes celulares primarias de las secundarias. Molecularmente es una tiazina.

Procedimiento

Azul de toluidina (C.I. 52040) ... 0.5 g

Ácido acético glacial ... 1 ml

Agua destilada o tampón acetato pH 4 ... 99 ml

Consejos

El pH óptimo de trabajo puede variar entre 3 y 5.5, dependiendo del fijador y tipo de tejido. El tiempo de tinción es de unos 3 minutos. La deshidratación ha de ser rápida empezando con el alcohol de 95º puesto que el colorante se puede perder durante estos pasos.

Hay una solución para mantener el color durante la deshidratación y es convertirlo en molibdato insoluble. Esto se puede hacer sumergiendo las secciones recien teñidas con azul de metileno, y lavadas en agua destilada, en molibdato de amonio al 5% en solución acuosa durante 5 min. Tras lavar ya se puede deshidratar sin problema.

Los núcleos y los carbohidratos se tiñen de azul, aunque presenta metacromasia para algunas estructuras celulares.

Productos

Azul de toluidina (C.I. 52040)

Ácido acético glacial

Tampón acetato

Agua destilada

Material

Probeta

Balanza

Agitador magnético

Medidor de pH

Vasos de precipitado

Botellas con cierre hermético

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Actualizado: 29-07-2019. 13:27