Atlas de histología vegetal y animal

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Técnicas histológicas. Protocolos

GOMORI - ARGÉNTICA

Esta impregnación argéntica se utiliza para poner de manifiesto a las fibras reticulares, las cuales son fácilmente observables en los tejidos linfoides y en la médula ósea.

Procedimiento

Partimos de muestras que han sido fijadas e incluidas en parafina. Estas muestras se han cortado en secciones de unas 8 µm de grosor y adheridas a portaobjetos recubiertos con gelatina-alumbre.

1.- 2x10 min en xileno para desparafinar

2.- 2x10 min en etanol 100º

3.- 10 min en etanol 96º

4.- 10 min en etanol 80º

5.- 10 min en etanol 50º

6.- 5 min en H2O destilada

7.- 1-2 min de oxidación en permanganato potásico al 1 % en H2O destilada

8.- Varios lavados en H2O destilada.

9.- 1 min de blanqueo en metabisulfito potásico al 3 % en H2O destilada

10.- 5 min de lavado con agua corriente abundante

11.- 1 min en solución de alumbre férrico al 2 % en H2O destilada (solución recién preparada).

12.- 10 min de lavados con agua corriente.

13.- 2 x 2 min lavados en H2O destilada.

14.- 1 min de incubación en el complejo argéntico (solución recién preparada).
El complejo argéntico está formado por plata amoniacal diluida 1:1 en H2O destilada. Preparación: 10 ml de solución de nitrato de plata al 10%, 2 ml de hidróxido de potasio al 10 %. Se forma un precipitado que se disuelve con amoniaco concentrado. Tras tener la solución clara se añade más nitrato de plata hasta que empiece a haber precipitado de nuevo. Entonces preparar el complejo argéntico.

15.- 10 s de lavado con agua destilada (sacar y meter las secciones)

16.- Reducir con formol (formaldehído al 10 %) Deterner la reducción mediante observación.

17.- 5 min de lavado en agua corriente.

18.- 1 min en metabisulfito potásico al 1 %.

19.- 1 min en tiosulfato sódico al 1 %.

20.- 5 min de lavado en agua corriente.

21.- 1 min en H2O destilada.

22.- 5 min en etanol 50º

23.- 5 min en etanol 70º

24.- 5 min en etanol 80º

25.- 5 min en etanol 96º

26.- 2x5 min en etanol 100º

27.- 2x5 min en xileno

28.- Montar con medio de montaje.

Resultados

Fibras reticulares: negras.

Colágeno: amarillento.

Consejos

Uno de los pasos críticos para tener una buena coloración es el tiempo de reducción con formol, el cual debe determinarse empíricamente.

Es también importante que el paso previo a la reducción sea muy rápido.

Productos

Xileno

Etanol de 50º, 70º, 80º, 96º y 100º

Permanganto potaśico al 0.5 %

Metabisulfito potásico al 3 % y al 1 %

Alumbre de hierro al 2 %

Nitrato de plata al 10%

Hidróxido potásico al 10%

Amoniaco concentrado

Tiosulfato sódico al 1 %

H2O destilada

H2O corriente

Medio de montaje

Material

Probetas, frascos y botellas

Cubetas de tinción

Cesta para portas

Cubreobjetos

Gomori argéntica para fibras reticulares
Secciones de parafina de 8 µm de grosor de un ganglio linfático impregnadas con el protocolo de Gomori para fibras reticulares.
Gomori argéntica para fibras reticulares
Secciones de parafina de 8 µm de grosor de un ganglio linfático impregnadas con el protocolo de Gomori para fibras reticulares.
Gomori argéntica para fibras reticulares
Secciones de parafina de 8 µm de grosor de un ganglio linfático impregnadas con el protocolo de Gomori para fibras reticulares.
Gomori argéntica para fibras reticulares
Secciones de parafina de 8 µm de grosor de un ganglio linfático impregnadas con el protocolo de Gomori para fibras reticulares.
Gomori argéntica para fibras reticulares
Secciones de parafina de 8 µm de grosor de un ganglio linfático impregnadas con el protocolo de Gomori para fibras reticulares.
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