Atlas de histología vegetal y animal
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Técnicas histológicas. Protocolos.

COLORANTE

REACTIVO de SCHIFF

Es un reactivo muy utilizado en la tinción de PAS-hematoxilina. Es un compuesto preparado a partir de fucsina básica (clorohidrato de pararosanilina), ácido clorhídrico y metabisulfito sódico o potásico. Se utiliza tradicionalmente para detectar polisacáridos, más concretamente grupos aldehídos que se crean en sus moléculas durante el proceso de tinción (ver el protocolo de la tinción de PAS-Hematoxilina). Hay varias maneras de preparar el reactivo de Schiff según se describe en el libro de Martoja y Martoja. "Initiations aux techniques de l'hisotlogie animale". Pierson 1970 (Edición en español de 1970, Toray-Masson).

Procedimiento
  • Método de Coleman
  • Agua hirviendo
  • Fucsina básica (clorhidrato de pararosanilina)

    Dejar enfriar tras la disolución

  • Metabisulfito potásico
  • Ácido clorhídrico normal

    Al cabo de 24 h se añade:

  • Carbón activo

  • 200 ml
  • 1 g

  • 2 g
  • 10 ml

  • 0,5 g
  • Agitar vigorosamente durante 1 min, dejar sedimentar y filtrar

  • Método de Lillie
  • Fucsina básica
  • Metabisulfito sódico
  • Áido clorhídrico

    Dejar que la solución se decolore agitando de vez en cuando. Cuando haya una casi total decoloración (12 a 24 h) se continúa con la receta

  • Carbón activo

  • 1 g
  • 1,9 g
  • 100 ml a 0,15 N



  • 0,5 g
  • Agitar vigorosamente durante 1 min, dejar sedimentar y filtrar

  • Método de Graumann
  • Fucsina ácida
  • Metabisulfito potásico
  • Ácido clorhídrico
  • Agua destilada

    Mezclar las soluciones, dejar sedimentar durante 24 h. Cuando se alcance una decoloración casi total se sigue con la receta

  • Carbón activo

  • 0,5 g
  • 0,5 g
  • 15 ml a 1 N
  • 85 ml


  • 0,5 g
  • Agitar vigorosamente durante 1 min, dejar sedimentar y filtrar

  • Consejos

    Independientemente del método de preparación del reactivo de Schiff, lasolución debe conservarse en la oscuridad en un frasco cerrado herméticamente. Es conveniente conservarlo en un frigorífico. Antes de cada uso comprobar que el reactivo desprende un olor sulfuroso. De lo contrario añadir 1 gota de ácido clorhídrico concentrado y unos decigramos de metabisulfito.

Productos
  • Fucsina básica
  • Metabisulficto sódico
  • Metabisulfito potásico
  • Ácido clorhídrico
  • Carbón activo
  • Agua destilada
Material
  • Probeta
  • Balanza
  • Agitador magnético / placa térmica
  • Vasos de precipitado
  • Botellas con cierre hermético
  • Papel de aluminio para mantenerlo en oscuridad
  • Nevera para su conservación